@article{Varela-M_Arias_Velásquez_2018, title={Estandarización de una prueba múltiple de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para la identificación de Angiostrongylus cantonensis, A. costaricensis y A. vasorum}, volume={38}, url={https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/3407}, DOI={10.7705/biomedica.v38i0.3407}, abstractNote={<p>Introducción. En el mundo, las angiostrongilosis de mayor impacto en salud humana y animal son ocasionadas por <em>Angiostrongylus cantonensis</em>, <em>A. costaricensis</em> y <em>A. vasorum</em>. En las personas, las formas clínicas son la meningitis eosinofílica y la angiostrongilosis abdominal, y, en los mamíferos cánidos, el daño cardiopulmonar. Se las consideran enfermedades emergentes debido a la propagación mundial del caracol africano <em>Lissachatina fulica</em>, un huésped intermediario de los parásitos. Los escasos métodos de identificación de <em>Angiostrongylus</em> spp. no son muy específicos ni sensibles y son costosos. Se necesita urgentemente una herramienta diagnóstica asequible, sensible y específica<br />para el manejo de las angiostrongilosis humana y la animal.<br />Objetivo. Desarrollar una prueba de PCR múltiple en tiempo real (qPCR) para identificar las tres especies patógenas de <em>Angiostrongylus</em>.<br />Materiales y métodos. Mediante un análisis bioinformático se seleccionó una secuencia del genoma ITS-2 de <em>Angiostrongylus</em> para garantizar la especificidad del cebador y las sondas. El ADN de los parásitos adultos (control positivo) y de las larvas se extrajo con el estuche DNeasyBlood & Tissue®.<br />Las reacciones de la PCR cuantitativa se ejecutaron en un termociclador Smartcycler Cepheid®, usando el estuche de mezcla maestra QuantiTect®. Como control negativo, se utilizó ADN humano, de otros parásitos y del caracol africano.<br />Resultados. Los valores del ciclo umbral para los controles positivos de ADN fueron: 21 para <em>Angiostrongylus cantonensis</em>, 22 para<em> A. costaricensis</em> y 31 para <em>A. vasorum</em>. En los controles negativos, el ciclo umbral fue cero. La qPCR mostró una eficiencia de amplificación de 2 (100 %).<br />Conclusiones. En el laboratorio se estandarizó una qPCR múltiple para tres especies clínicamente significativas de <em>Angiostrongylus</em>.</p>}, number={1}, journal={Biomédica}, author={Varela-M, Rubén E. and Arias, Jinney Stefany and Velásquez, Luz Elena}, year={2018}, month={mar.}, pages={111–119} }