Estandarización de un método de concentración y detección de virus entéricos en aguas de consumo

Dioselina Peláez, Johanna Alexandra Rodríguez, Elva Lucía Rocha, Gloria Janeth Rey, .

Palabras clave: Poliovirus, enterovirus, efecto citopático viral, reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa, calidad del agua

Resumen

Introducción. Los virus entéricos se han visto implicados en brotes de enfermedad diarreica aguda, enfermedades transmitidas por alimentos, hepatitis A y meningitis aséptica, en los que el vehículo de transmisión del agente ha sido el agua.
Objetivo. Estandarizar un método de concentración para la detección de virus entéricos en aguas de consumo.
Materiales y métodos. Se concentraron 20 litros de agua a un volumen de 6 ml mediante filtración y ultrafiltración tangencial. Como controles positivos se prepararon soluciones de 20 litros a concentraciones virales de 1, 10, 50 y 100 TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) de Poliovirus Sabin de tipo 1. Las partículas virales fueron recuperadas por cultivo en células sensibles a la infección e identificadas por amplificación del genoma viral mediante reacción en cadena de la polimerasa, siguiendo los estándares internacionales de los Centers for Disease Control and Prevention (CDC) de Atlanta.
Resultados. Todos los controles positivos causaron efecto citopático en células de rabdomiosarcoma y L20B y fueron detectados por RT- PCR (Real Time- PCR) convencional, directamente de las muestras. Los controles negativos no mostraron efecto citopático ni amplificación viral por RT-PCR.
Conclusiones. La ultrafiltración tangencial mostró ser un método rápido y eficaz al recuperar virus desde una TCID50, además de ser reproducible y sencillo. Tiene la ventaja de permitir la detección de su capacidad de contagiosidad viral por el cultivo celular, y la identificación por RT-PCR.

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.
  • Dioselina Peláez Laboratorio de Polio/EV/entéricos, Grupo de Virología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá D.C., Colombia.
  • Johanna Alexandra Rodríguez Laboratorio de Polio/EV/entéricos, Grupo de Virología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá D.C., Colombia.
  • Elva Lucía Rocha Laboratorio de Polio/EV/entéricos, Grupo de Virología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá D.C., Colombia.
  • Gloria Janeth Rey Laboratorio de Polio/EV/entéricos, Grupo de Virología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá D.C., Colombia.

Referencias bibliográficas

1. Fong TT, Lipp EK. Enteric viruses of human and animals in aquatic environments: health risks, detection and potential water quality assessment tools. Microbiol Mol Biol Rev. 2005;69:357-71.
2. Gantzer C, Maul A, Audic JM, Schwartzbrod L. Detection of infectious enterovirus, enterovirus genomes, somatic coliphages and Bacteroides fragilis phages in treated wastewater. Appl Environ Microbiol. 1998; 64:4307-12.
3. Universidad Federal de Santa Catarina, Fundação Oswaldo Cruz (Fio Cruz). Curso teórico-práctico "Virología ambiental". Florianóplolis, Brasil: Universidad Federal de Santa Catarina, Fiocruz; 2006. p. 1-40.
4. World Health Organization. The United Nations Climate Change Conference, Poznan, Polland, December 1-12, 2008. Geneva: WHO; 2008.
5. Organización para la Educación Científica y Cultural de las Naciones Unidas - UNESCO. El agua, una responsabilidad compartida. Segundo informe de las Naciones Unidas sobre el desarrollo de los recursos hídricos en el Mundo. Zaragoza: Ediciones UNESCO; 2006.
6. Organización Mundial de la Salud. 10 datos sobre la escasez de agua. Ginebra: OMS; 2007.
7. Chandramouli V, Neelakantan TR, Brion GM, Lingireddy S. Predicting enteric virus presence in surface waters using artificial neural network models. Environ Eng Sci. 2008;25:53-62.
8. Casas N, Suñen E. Detection of enterovirus and hepatitis A virus RNA in mussels (Mytilus spp.) by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. J Appl Microbiol. 2001;90:89-95.
9. Traore O, Arnal C, Mignotte B, Maul A, Laveran H, Billaudel S, et al. Reverse transcriptase PCR detection of astrovirus, hepatitis A virus, and poliovirus in experimentally contaminated mussels: comparison of several extraction and concentration methods. Appl Environ Microbiol. 1998;64:3118-22.
10. Borrego J, Moriño M, De Vicente A, Córnax R, Romero P. Coliphages as an indicator of faecal pollution in water. Its relationship with indicator and pathogenic microorganisms. Water Res. 1987;21:1473-80.
11. Soler M, Lobos S, Lorca M, Navarrete E. Enterovirus en aguas naturales de Valparaíso: una propuesta metodológica para su análisis. Rev Biol Mar Oceanogr. 2009; 44:511-6.
12. Arcos Pulido MP, Ávila de Navia SL, Estupiñán Torres SM, Gómez Prieto AC. Indicadores microbiológicos de contaminación de las fuentes de agua. Nova. 2005;3:69-79.
13. Campos-Pinilla C, Cárdenas-Guzmán M, Guerrero-Cañizares A. Comportamiento de los indicadores de contaminación fecal en diferentes tipos de aguas de la Sabana de Bogotá (Colombia). Universitas Scientiarum. 2008;13:103-8.
14. Ramírez V. Filtros electropositivos y reacción de PCR para la concentración y detección simultánea de virus y bacterias en aguas. Jiutepec, Morelos: Instituto Mexicano de Tecnología del Agua. Fecha de consulta: 15 de agosto de 2009. Disponible en: http://www.bvsde.paho.org/bvsaidis/impactos/mexicona/R-0213.pdf.
15. Del Puerto Rodríguez AM, Rojas MC, Iglesias AM. Calidad del agua y enfermedades de transmisión digestiva. Rev Cubana Med Gen Integr. 1999;15:495-502.
16. Chamorro C, Espinoza JC, Soto K, Kuznar J. Concentración de virus de la necrosis pancreática infecciosa mediante ultrafiltración de flujo tangencial combinado con filtración de exclusión. Arch Med Vet. 2006;38:77-82.
17. Ministerio de la Protección Social. Sistema para la protección y control de la calidad del agua para consumo humano. Decreto 1575 del 2007. Bogotá, D. C.: Ministerio de la Protección Social; 2007.
18. Millipore. Prep/Scale-TFF Cartridge holder. Instructions for installation and use (P34404). Bedford, MA: Millipore Corporation; 1995. p. 3-38.
19. Espigares M. Virus en aguas de consumo humano. Hig Sanid Ambient. 2006;6:173-89.
20. World Health Organization. PCR method for intratypic differentiation. En: Polio laboratory manual. Fourth edition. Geneva: WHO; 2004. p. 112-8.
21. Payment P, Trude M. Methods and techniques in virology. New York: Marcel Dekker; 1993. p. 25-40.
22. Abbaszadegan M, Stewart P, LeChevallier M. A strategy for detection of virus in Groundwater by PCR. Appl Environ Microbiol. 1999;65:444-9.
23. Federación Colombiana de Municipios. Informe de gestión de 2006. Fecha de consulta: 18 de octubre de 2007. Disponible en: http://www.fcm.org.co/index.php?id=37.
24. Katayama H, Shimasaki A, Ohgaki S. Development of concentration method and its application to detection of Enterovirus and Norwalk virus coastal seawater. Appl Environ Microbiol. 2002;68:1033-9.
25. Shay G, Martinson B, Moyer M, Dahling D. A multiplex reverse transcription -PCR method for detection of human enteric viruses in groundwater. Appl Environ Microbiol. 2003;69:3158-64.
26. Casares C, Albiñana P, Maluquer N, Motes M, Hundesa C, Girones A, et al. Efectos sobre la salud de la contaminación de agua y alimentos por virus emergentes humanos. Rev Esp Salud Pública. 2005;79:253-69.
Cómo citar
1.
Peláez D, Rodríguez JA, Rocha EL, Rey GJ. Estandarización de un método de concentración y detección de virus entéricos en aguas de consumo. biomedica [Internet]. 4 de agosto de 2010 [citado 29 de marzo de 2024];30(2):276-82. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/191

Algunos artículos similares:

Sección
Artículos originales

Métricas

Estadísticas de artículo
Vistas de resúmenes
Vistas de PDF
Descargas de PDF
Vistas de HTML
Otras vistas
QR Code