Rendimiento de la microscopía de fluorescencia LED para la detección de bacilos ácido-alcohol resistentes en muestras respiratorias en laboratorios periféricos de Argentina

María Imaz, Sonia Allassia, Mónica Aranibar, Alba Gunia, Susana Poggi, Ana Togneri, Lidia Wolff, Group of Implementation of Fluorescence, .

Palabras clave: tuberculosis, fluorescencia, microscopía, diagnóstico, esputo, bacilo ácido-alcohol resistente

Resumen

Introducción. La microscopía de fluorescencia con lámpara LED (MF-LED) ha sido recomendada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) para el diagnóstico de la tuberculosis, pero su precisión en pacientes con HIV continúa siendo controversial y en pocos estudios se han explorado los factores metodológicos que pueden afectar su utilidad.
Objetivo. Evaluar el rendimiento de la MF-LED en el diagnóstico de la tuberculosis en pacientes con HIV y sin él mediante un novedoso dispositivo LED.
Materiales y métodos. Se comparó el rendimiento de la MF-LED y la microscopía en frotis de muestras respiratorias con tinción de Ziehl-Neelsen (M-ZN) examinados por técnicos cegados en cuanto al estado de HIV y el resultado de la prueba comparativa. Se analizó el efecto de concentrar muestras antes de la microscopía, usar diferentes esquemas de observación y la valoración con el dispositivo LED.
Resultados. De las 6.968 muestras recolectadas, 869 (12,5 %) resultaron con cultivo positivo para Mycobacterium tuberculosis. La MF-LED fue 11,4 % más sensible que la M-ZN (p<0,01). Entre los pacientes con tuberculosis positivos para HIV, la diferencia de sensibilidad entre la MF-LED y la M-ZN (20,6 %) duplicó la cifra obtenida en pacientes negativos para HIV o con estatus desconocido (9,3 %). Al estratificar los frotis en directos y concentrados, se mantuvo la superioridad de la MF-LED. Las
especificidades de la MF-LED (99,9 %) y la M-ZN (99,9 %) resultaron elevadas. La lectura de una muestra de frotis mostró una positividad significativamente mayor con un aumento de 200X (49,4 %) que con uno de 400X (33,8 %) (p<0,05). El dispositivo LED tuvo una buena aceptación entre los técnicos.
Conclusión. Debido al mejor desempeño de la MF-LED comparada con la M-ZN en pacientes con HIV y su fácil utilización, se recomienda su adopción. La utilización del aumento de 200X fue esencial para el incremento de la sensibilidad de la MF-LED.

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  • María Imaz Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias “Emilio Coni”, ANLIS “C.G. Malbrán”, Santa Fe, Argentina
    Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis
  • Sonia Allassia Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Argentina
    Laboratorio de Tuberculosis
  • Mónica Aranibar Hospital San Roque, San Salvador de Jujuy, Argentina
  • Alba Gunia Laboratorio Central de Salud Pública, Resistencia, Argentina
  • Susana Poggi Hospital “Dr. Francisco Javier Muñiz”, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina
  • Ana Togneri Hospital Interzonal General de Agudos “Evita”, Lanús, Argentina
  • Lidia Wolff Hospital Rawson, Córdoba, Argentina
  • Group of Implementation of Fluorescence

Referencias bibliográficas

World Health Organization. Fluorescent Light-Emitting Diode (LED) microscopy for diagnosis of tuberculosis: Policy statement. Accessed: February 4, 2016. Available from: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/44602/1/9789241501613_eng.pdf?ua=1&ua=1

Steingart KR, Henry M, Ng V, Hopewell PC, Ramsay A, Cunningham J, et al. Fluorescence versus conventional sputum smear microscopy for tuberculosis: A systematic

review. Lancet Infect Dis. 2006;6:570-81.

Bennedsen J, Larsen SO. Examination for tubercle bacilli by fluorescence microscopy. Scand J Respir Dis. 1966;47:114-20.

Gordon C, van Deun A, Lumb R. Evaluating the performance of basic fuchsin for the Ziehl-Neelsen stain. Int J Tuberc Lung Dis. 2009;13:130-5.

van Deun A, Hossain M A, Gumusboga M, Rieder H L. Ziehl Neelsen staining: Theory and practice. Int J Tuberc Lung Dis. 2008;12:108-10.

Lumb R, van Deun A, Kelly P, Bastian I. Not all microscopes are equal. Int J Tuberc Lung Dis. 2006;10:227-9.

Kivihya-Ndugga LE, van Cleeff MR, Githui WA, Nganga LW, Kibuga DK, Odhiambo JA, et al. A comprehensive comparison of Ziehl-Neelsen and fluorescence microscopy for the diagnosis of tuberculosis in a resource-poor urban setting. Int J Tuberc Lung Dis. 2003;7:1163-71.

Prasanthi K, Kumari AR. Efficacy of fluorochrome stain in the diagnosis of pulmonary tuberculosis co-infected with HIV. Indian J Med Microbiol. 2005;23:179-81.

Albert H, Nakiyingi L, Sempa J, Mbabazi O, Mukkada S, Nyesiga B, et al. Operational implementation of LED fluorescence microscopy in screening tuberculosis suspects in an urban HIV clinic in Uganda. PLoS One. 2013;8:e72556. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0072556.

Whitelaw J, Peter H, Sohn D, Viljoen G, Theron M, Badri V, et al. A comparative cost and performance of lightemitting diode microscopy in HIV–tuberculosis-coinfected patients. Eur Respir J. 2011;38:1393-7. http://dx.doi.org/10.1183/09031936.00023211

Chaidir L, Parwati I, Annisa J, Muhsinin S, Meilana I, Alisjahbana B, et al. Implementation of LED fluorescence microscopy for diagnosis of pulmonary and HIV-associated tuberculosis in a hospital setting in Indonesia. PLoS One. 2013;8:e61727. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0061727

Getachew K, Abebe T, Kebede A, Mihret A, Melkamu G. Performance of LED fluorescence microscopy for the diagnosis of pulmonary tuberculosis in HIV positive individuals in Addis Ababa, Ethiopia. Tuberc Res Treat. 2015;2015:794064. http://dx.doi.org/10.1155/2015/794064

Bonnet M, Gagnidze L, Guerin PJ, Bonte L, Ramsay A, Githui W, et al. Evaluation of combined LED-fluorescence microscopy and bleach sedimentation for diagnosis of tuberculosis at peripheral health service level. PLoS One. 2011;6:e20175. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0020175

Imaz MS, Sequeira MD. Bacteriological diagnosis of tuberculosis in Argentina: Results of a national survey. Cad Saúde Pública. 2007;23:885-96. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-311X2007000400016

Zerbini E, Chirico MC, Salvadores B, Amigot B, Estrada S, Algorry G. Delay in tuberculosis diagnosis and treatment in four provinces of Argentina. Int J Tuberc Lung Dis. 2008;12:63-8.

Ministerio de Salud de Argentina. Manual para el diagnóstico bacteriológico de tuberculosis. Parte II. Cultivo. Buenos Aires: Ministerio de Salud; 2007.

Ministerio de Salud de Argentina. Manual para el diagnóstico bacteriológico de tuberculosis. Parte I. Baciloscopia. Santa Fe: Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias “E. Coni”; 2012.

Rieder H L, van Deun A, Kam K M, Kim S J, Chonde T M, Trébucq A, et al. Priorities for tuberculosis bacteriology services in low-income countries. Second edition. Paris: International Union against Tuberculosis and Lung Disease; 2007.

van Deun A, Chonde M, Gumusboga M, Rienthong S. Performance and acceptability of the FluoLED Easy module for tuberculosis fluorescence microscopy. Int J Tuber Lung

Dis. 2008;12:1009-14.

Xia H, Song YY, Zhao B, Kam K-M, O’Brien RJ, Zhang Z, et al. Multicentre evaluation of Ziehl-Neelsen and lightemitting diode fluorescence microscopy in China. Int J Tuber Lung Dis. 2013;17:107-12. http://dx.doi.org/10.5588/ijtld.12.0184

Reza LW, Satyanarayna S, Enarson DA, Kumar AM, Sagili K, Kumar S, et al. LED-Fluorescence microscopy for diagnosis of pulmonary tuberculosis under programmatic conditions in India. PLoS ONE. 2013;8:e75566. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0075566

Perkins M D, Roscigno G, Zumla A. Progress towards improved tuberculosis diagnostics for developing countries. Lancet. 2006;367:942-3.

Mambo-Muvunyi C, Masaisa F, Bayingana C, Musemakweri A, Mutesa L, Carbonell-Hernández T. Prevalence and diagnostic aspects of sputum smear positive tuberculosis cases at a tertiary care institution in Rwanda. Afr J Microbiol Res. 2010;4:88-91.

Marais BJ, Brittle W, Paincyzk K, Hesseling AC, Beyers N, Wasserman E, et al. Use of light-emitting diode fluorescence microscopy to detect acid-fast bacilli in sputum. Clin Infect Dis. 2008;47:203-7.

Trusov A, Bumgarner R, Valijev R, Chestnova R, Talevski S, Vragoterova C, et al. Comparison of Lumin LED fluorescent attachment, fluorescent microscopy and Ziehl-Neelsen for AFB diagnosis. Int J Tuber Lung Dis. 2008;13:836-41.

Chang EW, Page AL, Bonnet M. Light-emitting diode fluorescence microscopy for tuberculosis diagnosis: A meta-analysis. Eur Respir J. 2016;47:929-37. http://dx.doi.org/10.1183/13993003.00978-2015

Elliott AM, Halwiindi B, Hayes RJ, Luo N, Tembo G, Machiels L, et al. The impact of human immunodeficiency virus on presentation and diagnosis of tuberculosis in a cohort study in Zambia. J Trop Med Hyg. 1993;96:1-11.

Steingart KR, Ng V, Henry M, Hopewell PC, Ramsay A, Cunningham J, et al. Sputum processing methods to improve the sensitivity of smear microscopy for tuberculosis: A systematic review. Lancet Infect Dis. 2006;6:664-74. http://dx.doi.org/10.1016/S1473-3099(06)70602-8

Thapa B, Reza LW, Kumar AM, Pandey A, Satyanarayana S, Chadha S. Light Emitting Diode Fluorescence Microscopy increased the detection of smear-positives during follow-up of tuberculosis patients in India: Program implications. BMC Res Notes. 2015;8:596. http://dx.doi.org/10.1186/s13104-015-1584-z

Otero L, van Deun A, Agapito J, Ugaz R, Prellwitz G, Gotuzzo E, et al. Quality assessment of smear microscopy by stratified lot sampling of treatment follow-up slides. Int J Tuberc Lung Dis. 2011;15:211-6.

APHL/CDC/IUATLD/KNCV/RIT/WHO. External quality assessment for AFB smear microscopy. Washington, D.C.: APHL; 2002.

Smithwick RW. Laboratory manual for acid-fast microscopy. Atlanta, GA, USA: US Public Health Service; 1976.

Kubica GP. Correlation of acid-fast staining methods with culture results for mycobacteria. Bull Int Union Tuberc. 1980;55:117-24.

Affolabi D, Torrea G, Odoun M, Senou N, Ali Ligali M, Anagonou S, et al. Comparison of two LED fluorescence microscopy build-on modules for acid-fast smear microscopy. Int J Tuberc Lung Dis. 2010;14:160-9.

Bonnet M, Gagnidze L, Githui W, Guerin PJ, Bonte L, Varaine F, et al. Performance of LED-based fluorescence microscopy to diagnose tuberculosis in a peripheral health centre in Nairobi. PLoS ONE. 2011;6:e17214. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0017214.

Das D, Selvakumar N. Can LED fluorescence microscopy replace Ziehl-Neelsen microscopy in tuberculosis detection? Int J Tuberc Lung Dis. 2012;16:1558. http://dx.doi.org/10.5588/ijtld.12.0407

van Deun A, Cattamanchi A, Davis JL, Ridderhof J. In reply. Can LED fluorescence microscopy replace Ziehl-Neelsen microscopy in tuberculosis detection? Int J Tuberc Lung Dis. 2012;16:1558-9. http://dx.doi.org/10.5588/ijtld.12.0407-2

World Health Organization. Rapid implementation of the Xpert MTB/RIF diagnostic test. WHO/HTM/TB/2011.2. Geneva: WHO; 2011. Accessed: February 4, 2016. Available from: http://www.who.int/tb/features_archive/xpert_rapid_tb_test/en/

Álvarez-Uria G, Azcona JM, Midde M, Naik PK, Reddy S, Reddy R. Rapid diagnosis of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis in HIV-infected patients. Comparison of LED fluorescent microscopy and the Gene Xpert MTB/RIF assay in a District hospital in India. Tuberc Res Treat. 2012;932862. http://dx.doi.org /10.1155/2012/932862

World Health Organization. Twentieth global report on tuberculosis. WHO/HTM/TB/2015.22. Geneva: World Health Organization; 2015. Accessed: February 15, 2016. Available from: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/191102/1/9789241565059_eng.pdf

Cómo citar
1.
Imaz M, Allassia S, Aranibar M, Gunia A, Poggi S, Togneri A, et al. Rendimiento de la microscopía de fluorescencia LED para la detección de bacilos ácido-alcohol resistentes en muestras respiratorias en laboratorios periféricos de Argentina. biomedica [Internet]. 1 de junio de 2017 [citado 29 de marzo de 2024];37(2):164-7. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/3276

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2017-06-01
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