Producción y purificación de la proteína core del virus de la hepatitis C en el sistema de expresión del baculovirus para ensayos biológicos.

Ivonne Rubio, Alba Lucía Cómbita, Blanca Ortiz Reyes, María Cristina Navas, .

Palabras clave: virus de la hepatitis C, proteína Core, Baculovirus, sistema de expresión, isoelectroenfoque, purificación

Resumen

Introducción. La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) se caracteriza por la alta frecuencia de infección persistente. La capacidad del VHC para inducir alteraciones en la función de las células del sistema inmune, específicamente en las células dendríticas, parece ser una de las estrategias virales implicada en el establecimiento de la infección persistente. Esta estrategia parece estar mediada en gran parte por una de las proteínas estructurales codificada por el genoma del VHC, la proteína Core, unidad estructural de la cápside viral. Objetivo. Una de las limitantes para la evaluación de las propiedades de Core es la obtención y la purificación de la proteína nativa (191 aa). El objetivo de este estudio fue la producción y la purificación de la proteína Core completa en un sistema eucariote para evaluar las propiedades de la proteína en cultivos de células dendríticas humanas. Resultados. En este estudio se logró la producción de la proteína Core completa en el sistema de expresión de baculovirus y su purificación por la técnica de separación por punto isoeléctrico y electroelución. La pureza de la proteína obtenida se confirmó por Western blot y tinción con plata. Estos análisis mostraron dos bandas únicas correspondientes a las isoformas p23 y p21 de la proteína Core, previamente descritas en la literatura. Conclusiones. La proteína obtenida posee varias de las condiciones de la proteína Core nativa, como peso molecular, isoformas y localización subcelular. Los procedimientos descritos en este artículo son aplicables a proteínas asociadas a membranas producidas en sistemas de expresión eucarióticos.

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  • Ivonne Rubio Grupo de Gastrohepatología, Universidad de Antioquia, Medellin,
  • Alba Lucía Cómbita Grupo de Investigación en Biología del Cáncer, Instituo Nacional de Cancerología. Bogotá D.C.
  • Blanca Ortiz Reyes Grupo de Inmunología Celular e Inmunogenética, Universidad de Antioquia, Medellín.
  • María Cristina Navas Grupo de Gastrohepatología, Universidad de Antioquia, Medellin,
Cómo citar
1.
Rubio I, Cómbita AL, Ortiz Reyes B, Navas MC. Producción y purificación de la proteína core del virus de la hepatitis C en el sistema de expresión del baculovirus para ensayos biológicos. biomedica [Internet]. 1 de marzo de 2005 [citado 20 de octubre de 2020];25(1):34-5. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1325
Publicado
2005-03-01
Sección
Artículos originales