Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina

Sonia Rahiran, Zayra Garavito, Hernán Hurtado, .

Palabras clave: inmunocitoquímica, bromodeoxiuridina, cultivo celular, células de Schwann, proliferación celular

Resumen

Para evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoquimica con peroxidasa, se usaron varios tipos celulares y se obtuvieron resultados similares. Brevemente, se realiza una incubación con BrdU durante 48 horas y luego, se procesa el material celular para una inmunocitoquimica convencional que tiene como paso adicional la desnaturalización del ADN con HCI previa a la incubación con el anticuerpo primario anti-BrdU. Como cromógeno se usó la DAB (diaminobenzidina) o el AEC (aminoetilcarbazol). El procedimiento utilizado permite ver una tinción especifica para núcleos en células que entran en fase S y permite evaluar rápidamente el porcentaje de células que están proliferando en el cultivo.

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  • Sonia Rahiran Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
  • Zayra Garavito Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
  • Hernán Hurtado Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
Cómo citar
1.
Rahiran S, Garavito Z, Hurtado H. Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina. biomedica [Internet]. 1 de junio de 2000 [citado 14 de julio de 2024];20(2):144-50. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1057

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Publicado
2000-06-01
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Nota técnica

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