Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina

Sonia Rahiran, Zayra Garavito, Hernán Hurtado, .

Palabras clave: inmunocitoquímica, bromodeoxiuridina, cultivo celular, células de Schwann, proliferación celular

Resumen

Para evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoquimica con peroxidasa, se usaron varios tipos celulares y se obtuvieron resultados similares. Brevemente, se realiza una incubación con BrdU durante 48 horas y luego, se procesa el material celular para una inmunocitoquimica convencional que tiene como paso adicional la desnaturalización del ADN con HCI previa a la incubación con el anticuerpo primario anti-BrdU. Como cromógeno se usó la DAB (diaminobenzidina) o el AEC (aminoetilcarbazol). El procedimiento utilizado permite ver una tinción especifica para núcleos en células que entran en fase S y permite evaluar rápidamente el porcentaje de células que están proliferando en el cultivo.

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  • Sonia Rahiran Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
  • Zayra Garavito Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
  • Hernán Hurtado Laboratorio de Neurociencias, Instituto Nacional de Salud, Santa Fe de Bogotá, D.C.
Cómo citar
Rahiran, S., Garavito, Z., & Hurtado, H. (2000). Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina. Biomédica, 20(2), 144-150. https://doi.org/10.7705/biomedica.v20i2.1057
Publicado
2000-06-01
Sección
Nota técnica