Detección y expresión de SapS, una fosfatasa ácida no específica de clase C con actividad de fosfatasa O-fosfotirosina, en aislamientos de Staphylococcus aureus de pacientes con osteomielitis crónica

Carlos Martínez-Canseco, Rebecca E. Franco-Bourland, Norma González-Huerta, Marco Antonio Paredes-Espinosa, Silvia Giono-Cerezo, Laura Sánchez-Chapul, Rogelio Paniagua-Pérez, René Valdez-Mijares, Cecilia Hernández-Flores, .

Palabras clave: Staphylococcus aureus, factores de virulencia, osteomielitis

Resumen

Introducción. Se desconoce la identidad de los factores de virulencia de Staphylococcus aureus implicados en la osteomielitis crónica. Sin embargo, SapS, una fosfatasa ácida no específica de clase C, es un factor de virulencia reconocido y ya fue identificada en la cepa 154 de S. aureus, pero en extractos proteicos de vegetales podridos.
Objetivo. Detectar el gen SapS y caracterizar la actividad de la fosfatasa SapS en cepas de S. aureus aisladas de pacientes con osteomielitis crónica y en las reportadas en una base de datos de análisis in silico de genomas bacterianos completos.
Materiales y métodos. Se aisló y secuenció el gen SapS en los 12 aislamientos clínicos de S. aureus y en dos cepas de referencia; estas secuencias se analizaron junto con las secuencias de las cepas reportadas en la base de datos de genomas bacterianos: 49 cepas de S. aureus y 11 cepas de estafilococos negativos para coagulasa. Se evalúo la actividad de la fosfatasa SapS, presente en los extractos de los sobrenadantes de los cultivos de las cepas clínicas, mediante la hidrólisis de fosfato p-nitrofenil, O-fosfo-Ltirosina, O-fosfo-L serina y O-fosfo-L treonina junto con varios inhibidores de fosfatasas.
Resultados. Se detectó el gen SapS en el genoma de las cepas clínicas y en las 49 cepas de S. aureus analizadas in silico, pero no en las 11 cepas de estafilococos negativos para coagulasa. La secuenciación de SapS reveló un péptido señal presente en el extremo N-terminal de proteínas extracelulares y los dominios bipartitos de aspartato (DDDD) en su sitio catalítico. SapS hidroliza selectivamente el fosfato p-nitrofenil y la O-fosfo-L-tirosina, pero es sensible a vanadato y molibdato.
Conclusión. Se encontró SapS en el genoma de S. aureus de las cepas clínicas y de las cepas de simulación computacional. La SapS con actividad específica para la hidrólisis de la O-fosfo-L-tirosina comparte similitudes bioquímicas con las fosfatasas-tirosina bacterianas, por lo que puede formar parte de la red de factores de virulencia de la osteomielitis crónica.

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  • Carlos Martínez-Canseco Servicio de Bioquímica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0002-3889-608X
  • Rebecca E. Franco-Bourland Servicio de Bioquímica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0001-6385-7106
  • Norma González-Huerta Servicio de Medicina Genómica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México
  • Marco Antonio Paredes-Espinosa Servicio de Bioterio y Cirugía Experimental, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0002-5915-9716
  • Silvia Giono-Cerezo Laboratorio de Bacteriología Médica, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0003-1835-6788
  • Laura Sánchez-Chapul Laboratorio de Enfermedades Neuromusculares, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0002-4268-2279
  • Rogelio Paniagua-Pérez Servicio de Bioquímica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0003-3274-2941
  • René Valdez-Mijares Servicio de Bioquímica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0001-7920-9015
  • Cecilia Hernández-Flores Servicio de Bioquímica, Instituto Nacional de Rehabilitación “Luis Guillermo Ibarra Ibarra”, Ciudad de México, México https://orcid.org/0000-0001-6115-3287

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Cómo citar
1.
Martínez-Canseco C, Franco-Bourland RE, González-Huerta N, Paredes-Espinosa MA, Giono-Cerezo S, Sánchez-Chapul L, et al. Detección y expresión de SapS, una fosfatasa ácida no específica de clase C con actividad de fosfatasa O-fosfotirosina, en aislamientos de Staphylococcus aureus de pacientes con osteomielitis crónica. biomedica [Internet]. 30 de junio de 2023 [citado 19 de junio de 2024];43(2):200-12. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/6604

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2023-06-30
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