Evaluación de varias técnicas de extracción de ADN de Cryptococcus spp. a partir de muestras ambientales.

Alexandra Castañeda, Juan McEwen, Marylin Hidalgo, Elizabeth Castañeda, .

Palabras clave: Cryptococcus spp., ecología, extracción de ADN, PCR, muestras ambientales

Resumen

El género Cryptococcus comprende, al menos, 38 especies, pero sólo 3 se han informado como patógenas para el hombre y los animales: Cryptococcus laurentii, Cryptococcus albidus y Cryptococcus neoformans; esta última es la más frecuente. La infección se adquiere por la inhalación de los propágulos infectantes del medio ambiente. Los estudios del hábitat se han realizado con técnicas de extracción con soluciones tampón y cultivos en medios selectivos. El objetivo del trabajo fue evaluar varias técnicas de extracción del ADN de Cryptococcus spp. a partir de muestras ambientales. Como controles se emplearon aislamientos de C. neoformans, C. albidus, C. laurentii y Paracoccidiodes brasiliensis. Se emplearon vermiculitas, suelos contaminados en el laboratorio con 10 a 106 blastoconidias/g y muestras naturalmente colonizadas con C. neoformans. El ADN se extrajo con métodos físicos, químicos y con un estuche comercial, y se purificó usando bloques de agarosa y columnas de sílica. Para la amplificación con PCR se emplearon los iniciadores CN4-CN5 específicos para C. neoformans. Sólo el estuche comercial permitió extraer y purificar el ADN de las muestras de suelos contaminados hasta una concentración de 10 blastoconidias/g de suelo y de una de las muestras naturalmente colonizadas. Con este trabajo se logró la extracción y amplificación de ADN de Cryptococcus spp. a partir de muestras ambientales lo cual constituye una herramienta importante para delimitar las áreas ecológicas de C. neoformans en nuestro país.

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  • Alexandra Castañeda Grupo de Microbiología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, DC, Colombia.
  • Juan McEwen Corporación para Investigaciones Biológicas, CIB, Medellín; Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín
  • Marylin Hidalgo Grupo de Microbiología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, D.C.
  • Elizabeth Castañeda Grupo de Microbiología, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, D.C.
Cómo citar
1.
Castañeda A, McEwen J, Hidalgo M, Castañeda E. Evaluación de varias técnicas de extracción de ADN de Cryptococcus spp. a partir de muestras ambientales. biomedica [Internet]. 1 de septiembre de 2004 [citado 24 de febrero de 2024];24(3):324-31. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1279

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Publicado
2004-09-01
Sección
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