El análisis molecular y el inmunogénico sugieren la ausencia de las proteínas hidrofílicas de superficie en Leishmania (Viannia) panamensis

Marcel Marín, Yudy Alexandra Aguilar, José Robinson Ramírez, Omar Triana, Carlos Enrique Muskus, .

Palabras clave: Leishmania, reacción en cadena de la polimerasa, clonación molecular, datos de secuencia molecular, prueba ELISA, Western blotting

Resumen

Introducción. Los dos subgéneros en los cuales se divide el género Leishmania: Viannia y Leishmania, presentan diferencias significativas en las manifestaciones clínicas que causan, en su comportamiento de crecimiento en cultivos in vitro, en sus características genéticas y en la expresión de varias proteínas, entre ellas las de la familia hidrofílica de superficie superficie. Objetivo. Caracterizar las proteínas hidrofílicas de superficie en Leishmania (Viannia) panamensis. Materiales y métodos. Se amplificaron los genes hasp en L. (V.) panamensis usando cebadores específicos para la especie Leishmania (Leishmania) major. Los productos de la amplificación fueron clonados, secuenciados y analizados con herramientas bioinformáticas. Posteriormente, se realizó un análisis serológico por medio de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas y Western blot para detectar la presencia de anticuerpos específicos contra las proteínas hidrofílicas recombinantes de superficie de L. (L.) major en sueros de pacientes con leishmaniasis de zonas endémicas de Colombia. Resultados. Se encontró una copia de un pseudogen en L. (V.) panamensis, el cual presentó una identidad del 60% con el gen haspa de L. (L.) major. Sólo se encontraron anticuerpos contra las proteínas recombinantes de superficie hidrofílicas en sueros de pacientes con leishmaniasis visceral. Conclusión. Estos resultados sugieren que no existe ninguna copia de un gen funcional hasp en L. (V.) panamensis, lo que indica una pérdida de la familia de genes en esta especie de Leishmania perteneciente al subgénero Viannia.

Descargas

La descarga de datos todavía no está disponible.
  • Marcel Marín Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET), Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
  • Yudy Alexandra Aguilar Grupo Investigador de Problemas en Enfermedades Infecciosas (GRIPE), Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
  • José Robinson Ramírez Grupo de Inmunomodulación, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
  • Omar Triana Grupo de Inmunomodulación, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
  • Carlos Enrique Muskus Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET), Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia

Referencias

1. Killick-Kendrick R. Biology of leishmania in phlebotomine sand flies. In: Lumsden WH, Evans DA, editors. Biology of the kinetoplastida. London: Academic Press; 1979. p. 395-460. 
2. Vélez ID, Hendrick E, Robledo SM, Agudelo SP. Leishmaniosis cutánea en Colombia y género. Cad Saúde Pública. 2001;17:171-80. 
3. Ovalle CE, Porras L, Rey M, Ríos M, Camargo YC. Distribución geográfica de especies de Leishmania aisladas de pacientes consultantes al Instituto Nacional de Dermatología Federico Lleras Acosta, E.S.E., 1995-2005. Biomédica. 2006;26(Supl.1):145-51. 
4. Lane RP. Sandflies (Phlebotominae). In: Lane RP, Crosskey RW, editors. Medical insects and arachnids. Cambridge: Chapman and Hall; 1993. p. 78-119. 
5. Kedzierski L, Montgomery J, Bullen D, Curtis J, Gardiner E, Jimenez-Ruiz A, et al. A leucine-rich repeat motif of Leishmania parasite surface antigen 2 "binds to macrophages through the complement receptor 3. J Immunol. 2004;172:4902-6. 
6. McMahon-Pratt D, Traub-Cseko Y, Lohman KL, Rogers DD, Beverley SM. Loss of the GP46/M-2 surface membrane glycoprotein gene family in the Leishmania braziliensis complex. Mol Biochem Parasitol. 1992;50:151-60. 
7. McMahon-Pratt D, Alexander J. Does the Leishmania major paradigm of pathogenesis and protection hold for New World cutaneous leishmaniases or the visceral disease?. Immunol Rev. 2004;201:206-24. 
8. Marín M, Muskus C, Ramírez JR, Arbeláez LF, Alzate JF, Berberich C. The gene encoding the metacyclogenesis-associated transcript Mat-1 is conserved in the genus Leishmania and shows a tendency to form dimers upon protein expression. Parasitol Res. 2000;86:431-5. 
9. Peacock CS, Seeger K, Harris D, Murphy L, Ruiz JC, Quail MA, et al. Comparative genomic analysis of three Leishmania species that cause diverse human disease. Nat Genet. 2007;39:839-47. 
10. Muskus, C, Segura I, Oddone R, Turco SJ, Leiby DA, Toro L, et al. Carbohydrate and LPG expression in Leishmania Viannia subgenus. J Parasitol. 1997;83: 671-8. 
11. Hommel M, Jaffe CL, Travi B, Milon G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann Trop Med Parasitol. 1995;89(Suppl.1):55-73. 
12. Henao HH, Osorio Y, Saravia NG, Gómez A, Travi B. Eficacia y toxicidad de los antimoniales pentavalentes (Glucantime® y Pentostam®) en un modelo animal de leishmaniasis cutánea americana: aplicación de la luminometría. Biomédica. 2004;24:393-402. 
13. Britto C, Ravel C, Bastien P, Blaineau C, Pages M, Dedet JP, et al. Conserved linkage groups associated with large-scale chromosomal rearrangements between Old World and New World Leishmania genomes. Gene. 1998;222:107-17. 
14. Robinson KA, Beverley SM. Improvements in transfection efficiency and tests of RNA interference (RNAi) approaches in the protozoan parasite Leishmania. Mol Biochem Parasitol. 2003;128:217-28. 
15. Flinn HM, Rangarajan D, Smith DF. Expression of hydrophilic surface protein in infective stages of Leish-mania major. Mol Biochem Parasitol. 1994;65:259-70. 
16. Pimenta PF, Pinto da Silva P, Rangarajan D, Smith DF, Sacks DL. Leishmania major: association of the differentially expressed gene B protein and the surface lipophosphoglycan as revealed by membrane capping. Exp Parasitol. 1994;79:468-79. 
17. Rangarajan D, Gokool S, McCrossan MV, Smith DF. The gene B protein localise to the surface of Leishmania major parasites in the absence of metacyclic stage lipophosphoglycan. J Cell Sci. 1995; 108:3359-66. 
18. Jensen AT, Gaafar A, Ismail A, Christensen CB, Kemp M, Hassan AM, et al. Serodiagnosis of cutaneous leishmaniasis: assessment of an enzyme-linked immunosorbent assay using a peptide sequence from gene B protein. Am J Trop Med Hyg. 1996;55:490-5. 
19. Jensen AT, Gasim S, Moller T, Ismail A, Gaafar A, Kemp M, et al. Serodiagnosis of Leishmania donovani infections: assessment of enzyme-linked immunosorbent assays using recombinant L. donovani gene B protein (GBP) and a peptide sequence of L. donovani GBP. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1999;93:157-60. 
20. Stager S, Smith DF, Kaye PM. Immunization with a recombinant stage-regulated surface protein from Leishmania donovani induces protection against visceral leishmaniasis. J Immunol. 2000;165:7064-71. 
21. Medina-Acosta E, Cross G. Rapid isolation of DNA from trypanonosomatid protozoa using a simple "mini-prep" procedure. Mol Biochem Parasitol. 1993;59:327-9. 
22. Bhatia A, Daifalla NS, Jen S, Badaro R, Reed SG, Skeiky YA. Cloning, characterization and serological evaluation of K9 and K26: two related hydrophilic antigens of Leishmania chagasi. Mol Biochem Parasitol. 1999;102:249-61. 
23. Alce TM, Gokool S, McGhie D, Stager S, Smith DF. Expression of hydrophilic surface proteins in infective stages of Leishmania donovani. Mol Biochem Parasitol. 1999;102:191-6. 
24. Lainson R, Shaw JJ. Evolution, classification and geographical distribution. In: Peters W, Killick-Kendrick R, editors. The leishmaniases in biology and medicine. London: Academic Press; 1987. p. 1-120. 
25. Folgueira C, Canavate C, Chicharro C, Requena JM. Genomic organization and expression of the HSP70 locus in New and Old World Leishmania species. Parasitology. 2007;134:369-77. 
26. Smith DF, Peacock CS, Cruz AK. Comparative genomics: from genotype to disease phenotype in the leishmaniases. Int J Parasitol. 2007;37:1173-86. 
27. Eschenlauer SC, Coombs GH, Mottram JC. PFPI-like genes are expressed in Leishmania major but are pseudogenes in other Leishmania species. FEMS Microbiol Lett. 2006;260:47-54. 
28. Denny PW, Gokool S, Russell D, Field M, Smith D. Acylation-dependent protein export in Leishmania. J Biol Chem. 2000;275:11017-25. 
29. McKean PG, Denny PW, Knuepfer E, Keen JK, Smith DF. Phenotypic changes associated with deletion and overexpression of a stage-regulated gene family in Leishmania. Cell Microbiol. 2001;3:511-23. 
30. McKean PG, Trenholme KR, Rangarajan D, Keen J, Smith DF. Diversity in repeat-containing surface proteins of Leishmania major. Mol Biochem Parasitol. 1997;86:225-35.  
Cómo citar
Marín, M., Aguilar, Y. A., Ramírez, J. R., Triana, O., & Muskus, C. E. (2008). El análisis molecular y el inmunogénico sugieren la ausencia de las proteínas hidrofílicas de superficie en Leishmania (Viannia) panamensis. Biomédica, 28(3), 423-432. https://doi.org/10.7705/biomedica.v28i3.80
Publicado
2008-09-01
Sección
Artículos originales